冷冻胚胎的解冻(Thawing of embryos):是指在冻胚移植前将保存在生殖中心或者医疗机构-196℃液氮中的冷冻胚胎用科学的方法在应用前对其进行复温处理。解冻前常需对母体身体进行一系列的检查,以确定满足做冻胚移植的条件以及移植数量和移植时间。
常用慢速冷冻胎与玻璃化冷冻胚胎解冻步骤流程之比较。
一、试剂与耗材
1、试剂:Quinn’s、ART-8005-12、ART-8007-12、ART-8013-12
2、耗材:四孔板,巴氏吸管,移液管
二、步骤
1、解冻前一日,用G-II-plus在35mm培养皿中制作8个微滴,覆盖组织培养用油,置37℃,7%CO2, 5%O2平衡过夜。解冻日从冰箱中取出解冻液恢复至室温。准备四孔板,8005、8007、8013分别0.6ml,盖热矿物油,置无二氧化碳培养箱中待用。
2、核实患者姓名、冷冻编号及储存位置。
3、将冷冻管从液氮中取出,拧松盖子放出液氮,空气中约30s,放入37℃水浴至完全融化。
4、再次核对姓名,解剖镜下将冷冻管内所有液体吸入60mm培养皿中央,寻找全部胚胎,用巴氏吸管依次转入8005,10min、8007,10min、8013,10min。
5、再次核对姓名,将胚胎转入G-II-Plus中,漂洗3-4个液滴转入培养用液滴,倒置显微镜下观察并记录胚胎复苏情况,于37℃,7%CO2, 5%O2培养箱过夜。
6、FET日早晨观察解冻后的胚胎,记录胚胎生长情况。
7、如胚胎均未复苏,应及时通知临床医师。如解冻胚胎未生长,应及时与临床医师、患者沟通,决定是否移植。
8、FET步骤同新鲜周期胚胎移植。
一、试剂与耗材
1、试剂:KITAZATO,TS(Thawing Solution)DS(Diluent Solution)WS1,WS2 (Washing Solution)
2、耗材:四孔板,巴氏吸管,移液管
二、步骤
1、将上述试剂从冰箱内取出并预热至37℃。
2、核实患者姓名、冷冻编号及储存位置。
3、将装有胚胎的冷冻管从液氮中取出并迅速浸入TS中,计时1min
4.将冷冻胚胎从TS转入DS底部,计时3min。
5、将上述处理过的胚胎从DS转入WS1底部,计时5min。
6、用WS2冲洗巴氏吸管, 将上述处理胚胎从WS1转入WS2底部,换不同位置冲洗胚胎,计时5min。
7、吸上述处理胚胎至培养基,置于37℃,7%CO2,5%O2培养箱培养2h。
8、倒置显微镜下观察并记录胚胎复苏情况,于37℃,7%CO2,5%O2培养箱过夜
9、FET日早晨观察解冻后的胚胎,记录胚胎生长情况。
10、如胚胎均未复苏,应及时通知临床医师。如解冻胚胎未生长,应及时与临床医师、患者沟通,决定是否移植。
11、FET步骤同新鲜周期胚胎移植。
几乎每个患者都会问到这样一个问题:我有三个冻胚,解冻后是不是都可以移植呢?专家介绍,胚胎冷冻是保留胚胎的一种技术。冷冻胚解冻之后是否能够移植,和以下两个方面有关。
1、胚胎质量:如果胚胎冷冻前质量非常好,那么他就适合冷冻,将这个优质胚胎解冻之后它成活率相对高;如果胚胎冷冻前本身质量不好,在新鲜胚胎的培养过程中就已经有很多碎片、细胞数量不够等影像胚胎发育的因素存在,这种情况下冷冻的胚胎再解冻,其着床能力和成活概率均会受到影响。
2、实验室水平:胚胎冷冻不同于我们自家使用的冰箱冷冻保管东西,它不是一个简单的降温过程;如果实验室水平不达标,胚胎冷冻、保存及解冻过程中很容易受到损伤,继而影响胚胎复苏率;为避免上述情况发生,目前常规采用的是一种更先进的冷冻技术——玻璃化冷冻技术。
综上便是本文的简单介绍,相信大家可能明白了,关于冷冻胚胎解冻移植事宜,需与我们主管医师及胚胎室人员充分沟通后,从自身条件和胚胎复苏率等多方面制定最适合自己的策略和方案。